人脯氨酸4-羟化酶α亚基异构体α (II)的克隆及II型酶四聚体的鉴定。α (I)和α (II)亚基不形成混合α (I) α (II) β 2四聚体。
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刘建军，李建军，刘建军，刘建军
人脯氨酸4-羟化酶α亚基异构体α (II)的克隆及II型酶四聚体的鉴定。α (I)和α (II)亚基不形成混合α (I) α (II) β 2四聚体。
生物化学学报，1997,11;32(2):344 - 344。
- PubMed ID
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9211872 (PubMed视图]
- 摘要
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脯氨酸羟化酶(proline hydroxylase, EC 1.14.11.2)催化胶原中4-羟基脯氨酸的形成。该脊椎动物酶是一种alpha2beta2四聚体，其β亚基与蛋白二硫异构酶相同(PDI, EC 5.3.4.1)。我们在这里报告克隆最近发现的α (II)亚单位从人的来源。α (II)亚基mRNA在多种人体组织中均有表达，在培养的人WI-38和HT-1080细胞中发现了相应的多肽和(α (II))2beta2四聚体的存在。II型四聚体在这些细胞中约占总脯氨酸4-羟化酶的30%，在各种鸡胚组织中约占5-15%。beplayapp昆虫细胞共表达的结果强烈反对形成混合α (I) α (II) β 2四聚体。在其N端含有组氨酸标签的PDI/ β多肽与野生型PDI/ β多肽一样容易形成脯氨酸4-羟化酶四聚体，并且组氨酸标记形式的脯氨酸4-羟化酶似乎为重组酶的简单大规模纯化提供了极好的来源。纯化的人II型酶的性质与I型酶非常相似，但前者对聚l -脯氨酸的Ki值约为后者的200-1000倍。beplayapp与此一致的是，两种酶在三种肽底物的Km值上存在约3-6倍的微小差异。beplayapp人类细胞中存在两种形式的脯氨酰4-羟化酶，这提高了一种酶形式的突变可能不会致命的可能性，尽管这种酶在所有胶原的合成中起着核心作用。