噬菌体展示肽11敏感序列映射绑定laminin-1。
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Kazmin哒,霍伊特TR, Taubner L, Teintze M,斯达克
噬菌体展示肽11敏感序列映射绑定laminin-1。
J杂志。2000年5月5日,298 (3):431 - 45。
- PubMed ID
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10772861 (在PubMed]
- 文摘
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我们利用一个9 mer随机的噬菌体展示库识别序列结合laminin-1洗提和硫酸乙酰肝素或肽11 (CDPGYIGSR)。被用于,biopan Laminin-1 derivatized盘子。连续3轮低pH值进行洗脱,紧随其后的是特定洗脱的三轮,每个组成的硫酸乙酰肝素洗脱肽11洗脱紧随其后。随机序列插入测序了噬菌体种群在低pH值,筛选了硫酸乙酰肝素和肽11。具体筛选了噬菌体种群表现出三类mimotopes不同地区的cDNA衍生氨基酸序列的67 kDa层粘连蛋白结合蛋白(LBP)。这些区域(1)一个回文序列被称为肽G,(2)预测螺旋域对应LBP残留205 - 229,和(3)TEDWS-containing c端重复。所有洗脱条件也产生了噬菌体与假定的肝素结合序列。我们模拟了枸杞多糖(205 - 229)领域,这是强烈预测螺旋二级结构,并确定该地区可能具有heparin-binding特征位于螺旋的一侧,而另一侧似乎包含一个疏水肽11可以绑定。使用ELISA板化验,我们表明,肽11和硫酸乙酰肝素单独绑定到合成枸杞多糖肽(205 - 229)。我们还证明了QPATEDWSA laminin-1肽能抑制肿瘤细胞粘附。 These data support the proposal that the 67 kDa LBP can bind the beta-1 laminin chain at the peptide 11 region, and suggest that heparan sulfate is a likely alternate ligand for the binding interactions. Our results also confirm previous data suggesting that the most C-terminal region of the LBP, which contains the TEDWS repeats, is involved in cell adhesion to laminin-1, and we specifically implicate the repeat sequence in that activity.