小说的互补编码的选择性隔离区域周围的人类白介素4和5基因。
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摩根詹,Dolganov通用,罗宾斯,辛顿LM,洛维特M
小说的互补编码的选择性隔离区域周围的人类白介素4和5基因。
核酸研究》1992年10月11日,20 (19):5173 - 9。
- PubMed ID
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1408833 (在PubMed]
- 文摘
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我们开发了修改直接cDNA选择,允许快速和可再生的隔离的低丰度的互补编码由大型基因组克隆。生物素化的,克隆在溶液中基因组dna杂交amplifiable互补。基因克隆和附加的互补链霉亲和素涂磁珠捕获,互补筛选了和放大。我们有这个协议适用于一个包含人类IL4和425 kb YAC IL5基因。浓缩24互补两个周期后进行评估,所有的YAC同源。DNA测序显示9个互补100%同源的干扰素调节因子1 (IRF1)基因。六个克隆小鼠P600基因同源,70%是coexpressed IL4和IL5鼠标Th2细胞。剩下的九个克隆中独特的序列数据库和非冗余。所有选择的互补最初出现在非常低的丰富和充实了100000倍浓缩的两个周期。这个修改选择技术应该很容易适用于许多疾病候选基因座的隔离以及详细的推导转录地图大基因组区域。