微粒体ER-60蛋白酶Cys-Gly-His-Cys (CGHC)和Gln-Glu-Asp-Leu (QEDL)特征基序的功能
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
Urade R, Oda T, Ito H，森山T，宇美S, Kito M
微粒体ER-60蛋白酶Cys-Gly-His-Cys (CGHC)和Gln-Glu-Asp-Leu (QEDL)特征基序的功能
生物化学杂志，1997 10月;122(4):834-42。
- PubMed ID
-
9399589 (PubMed视图]
- 摘要
-
利用pET-20b(+) T7启动子在大肠杆菌BL21 (DE3)细胞中表达人ER-60蛋白酶cDNA。重组ER-60蛋白酶以水溶性形式获得，并通过四次连续色谱纯化。ER-60蛋白酶含有两个CGHC基序。当两个基序的n端半胱氨酸残基被丙氨酸残基取代时，蛋白酶活性没有损失。然而，当两个基基的c端半胱氨酸残基被丝氨酸残基取代时，对氯代苯甲酸(pCMB)抑制而氟磷酸二异丙基(DFP)不抑制的半胱氨酸蛋白酶活性转变为DFP抑制而pCMB不抑制的丝氨酸蛋白酶活性。这些结果表明，CGHC基序的c端半胱氨酸残基可能构成ER-60蛋白酶的活性位点。ER-60蛋白酶有一个c端QEDL序列，通过删除QEDL序列被证明是er保留信号。然而，由于QEDL不能作为蛋白质二硫异构酶或ERp72的ER保留信号，这表明，除了QEDL序列本身之外，ER-60蛋白酶的氨基酸残基对该蛋白的ER保留起补充作用。