三个多肽组件的隔离和表征4-chlorobenzoate dehalogenase从假单胞菌CBS-3 sp.压力。
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Chang KH,梁的PH值,贝克W, Scholten JD, Dunaway-Mariano D
三个多肽组件的隔离和表征4-chlorobenzoate dehalogenase从假单胞菌CBS-3 sp.压力。
生物化学。1992年6月23日,31日(24):5605 - 10。
- PubMed ID
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1610806 (在PubMed]
- 文摘
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这三个基因编码4-chlorobenzene dehalogenase多肽是切除假单胞菌sp。CBS-3 DNA片段和大肠杆菌分别克隆和表达。的三个酶纯化各自积累使用硫酸铵沉淀步骤后跟一个或两个柱色谱步骤。4-chlorobenzoate:辅酶A连接酶被发现为(57-kDa单元大小),要求Mg2 + (Co2 +和Mn2 +也活化剂)活动,并交出MgATP(公里= 100 microM)、辅酶A(公里= 80 microM)和4-chlorobenzoate的速度(公里= 9 microM) 30 s - 1 pH值7.5和25度c .苯甲酸4-bromobenzoate, 4-iodobenzoate,和4-methylbenzoate被证明是替代基质而4-hydroxybenzoate 4-aminobenzoate, 2-aminobenzoate, 2, 3-dihydroxybenzoate, 4-coumarate,掌状的,月桂酸、己酸酯,丁酸、乙酸苯酯基质活跃。4-chlorobenzoate-coenzyme dehalogenase被发现一个homotetramer (30 kDa单元大小)有一个公里= 15 microM kcat = 0.3 s - 1在pH值7.5和25摄氏度和催化地活动对水化crotonyl-CoA, alpha-methylcrotonyl-CoA, beta-methylcrotonyl-CoA。4-hydroxybenzoate-coenzyme thioesterase被证明是一个homotetramer (16 kDa单元大小),有一个公里= 5 microM kcat = 7 s - 1在pH值7.5和25摄氏度,和也催化水解benzoyl-coenzyme 4-chlorobenzoate-coenzyme A . Acetyl-coenzyme, hexanoyl-coenzyme一,palmitoyl-coenzyme thioesterase不水解。