纯化和表征S-adenosyl-L-methionine: uroporphyrinogen三世甲基转移酶从假单胞菌denitrificans。
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布兰奇F,鲍特Debussche L D, Crouzet J,卡梅伦B
纯化和表征S-adenosyl-L-methionine: uroporphyrinogen三世甲基转移酶从假单胞菌denitrificans。
J Bacteriol。1989年8月,171(8):4222 - 31所示。
- PubMed ID
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2546914 (在PubMed]
- 文摘
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S-Adenosyl-L-methionine: uroporphyrinogen三世甲基转移酶(SUMT),钴胺素生物合成途径的酶催化C uroporphyrinogen三世的甲基化,从提取纯化大约150倍同质性假单胞菌的重组菌株denitrificans来源于cobalamin-overproducing应变通过硫酸铵分馏,阴离子交换色谱和羟磷灰石层析。beplayapp纯化蛋白质的等电点为6.4,分子量56500,估计由凝胶电泳凝胶过滤和30000年估计在变性条件下,表明为活跃的酶。它不含发色团的辅基,似乎并不需要金属离子或代数余子式的活动。SUMT催化连续两个c - 2,即甲基化反应参与uroporphyrinogen三世的转换通过中间precorrin-2 precorrin-1的形成。体外研究表明,中间monomethylated产品(precorrin-1)释放的蛋白质,然后添加到第二C-methylation酶反应。最佳pH值为7.7,S-adenosyl-L-methionine的Km值和uroporphyrinogen三世microM 6.3和1.0,分别和周转率的h - 38。酶活性被证明是完全不敏感反馈抑制维生素b12和corrinoid中间体在生理浓度测试。uroporphyrinogen三世浓度高于2 microM SUMT展出一种底物抑制现象。建议这个属性可能发挥监管作用在cobalamin-overproducing应变氰钴胺素生物合成的研究。