守恒的芳香族氨基酸残基的功能角色位置108(第四主题)和位置196(第八主题)基地翻转,从水生栖热菌N6-adenine DNA甲基转移酶催化的。
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聚氨酯H, Bleimling N, Holz B, Wolcke J, Weinhold E
守恒的芳香族氨基酸残基的功能角色位置108(第四主题)和位置196(第八主题)基地翻转,从水生栖热菌N6-adenine DNA甲基转移酶催化的。
生物化学。1999年2月2,38 (5):1426 - 34。
- PubMed ID
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9931007 (在PubMed]
- 文摘
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水生栖热菌的DNA甲基转移酶(Mtase) (M.TaqI)催化的活性甲基转移S-adenosyl-L-methionine N6位置的双链DNA序列中的腺嘌呤5“-TCGA-3”。实现催化M。TaqI翻转的靶腺嘌呤DNA螺旋。的基础上的三维结构。TaqI在复杂的代数余子式和其结构同源性嗜血杆菌的DNA C5-cytosine Mtase haemolyticus,酪氨酸提出了108年和196年板式换热器与extrahelical腺嘌呤。这两种芳香族氨基酸残基的功能角色在M。TaqI被突变分析调查。获得的突变体放在分析了一种改进的动态分析,并翻转的能力目标基础研究包含荧光的荧光技术分析使用双oligodeoxynucleotide基地模拟2-aminopurine在目标位置。而包含芳香族氨基酸的突变放在Trp位置108或196 (Y108W和F196W)显示几乎野生型催化活性,nonaromatic氨基酸的突变放在阿拉巴马州(Y108A和F196A)降低了强烈催化常数。Y108A仍能够翻转目标基础,而F196A强烈受损抛在基地。这些结果表明,板式换热器196是重要的稳定extrahelical目标腺嘌呤和表明,酪氨酸108年参与将extrahelical目标基地甲基转移的最优位置。 Since both aromatic amino acids belong to the conserved motifs IV and XIII found in N6-adenine and N4-cytosine DNA Mtases as well as in N6-adenine RNA Mtases, a similar function of aromatic amino acid residues within these motifs is expected for the different Mtases.