结构和机理的分析唾液酸合成酶NeuB从脑膜炎奈瑟菌在复杂Mn2 +磷酸烯醇丙酮酸,N-acetylmannosaminitol。
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谷纳温J, Simard D,吉尔伯特M,情人,Wakarchuk WW,坦纳我,Strynadka数控
结构和机理的分析唾液酸合成酶NeuB从脑膜炎奈瑟菌在复杂Mn2 +磷酸烯醇丙酮酸,N-acetylmannosaminitol。
280年J生物化学杂志。2005年2月4日,(5):3555 - 63。Epub 2004年10月29日。
- PubMed ID
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15516336 (在PubMed]
- 文摘
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脑膜炎奈瑟菌和相关细菌病原体,唾液酸扮演关键角色在哺乳动物细胞免疫逃避和由守恒的酶的合成途径,包括唾液酸合成酶(NeuB、汽车城或同步)。NeuB催化磷酸烯醇丙酮酸的缩合(PEP)和N-acetylmannosamine,直接形成N-acetylneuraminic酸(或唾液酸)。在本文中,我们报告的发展耦合的分析监控NeuB反应动力学和一个18 o-labeling研究演示了合酶通过切断键裂机制运作。我们也报告第一唾液酸合成酶的结构,NeuB,揭示了一个独特的domain-swapped为体系结构组成的(β/α)8桶(TIM桶)类型折叠氨基末端和域序列高身份和结构相似性的冰绑定类型III抗冻蛋白c端一端的酶。我们已经确定的结构NeuB malate-bound形式和绑定PEP和衬底模拟N-acetylmannosaminitol 1.9和2.2分辨率,分别。典型的蒂姆•桶蛋白的活性位点NeuB位于空腔的c端一端桶;然而,交换的定位antifreeze-like从邻域与基质单体提供氢键的关键残基NeuB的活性部位,结构特征导致不同的衬底绑定模式从其他PEP-utilizing酶缺乏一个类似的antifreeze-like域。我们的观察之间的直接互动的一个高度有序的锰和N-acetylmannosaminitol NeuB活性部位也表明离子作为亲电催化剂的重要作用,激活N-acetylmannosamine羰基的PEP。