结构研究黄素还原酶PheA2揭示绑定NAD的一个不寻常的折叠构象和支持小说的作用机制。
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van den Heuvel RH,韦氏比重啊,见鬼AJ,沃尔什马,Rovida年代,效力过WJ, Mattevi
结构研究黄素还原酶PheA2揭示绑定NAD的一个不寻常的折叠构象和支持小说的作用机制。
J生物化学杂志。2004年3月26日,279 (13):12860 - 7。Epub 2003年12月31日。
- PubMed ID
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14703520 (在PubMed]
- 文摘
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嗜热生物的分解代谢有毒酚类杆菌thermoglucosidasius A7是由双组分酶系统。较小的黄素催化还原酶PheA2组件自由时尚的减少NADH-dependent根据乒乓球bisubstrate-biproduct机制。然后使用更大的加氧酶减少时尚组件PheA1羟化酚类对应的儿茶酚。我们已经确定的x射线结构包含绑定PheA2时尚代数余子式(2.2),这是第一个结构这个黄素还原酶家族的成员。我们还决定减少holo-PheA2的x射线结构在复杂氧化NAD(2.1)。与每个FAD-containing PheA2是单个域homodimeric蛋白质亚基被围绕six-strandedβ褶板和限制阿尔法螺旋。结合紧密的时尚辅基结合(K (d) = 10海里)附近的二聚体界面,重新面对时尚异咯嗪环是完全暴露在溶剂。的NADH水晶PheA2减少黄素代数余子式,和NAD产品绑定在宽solvent-accessible槽采用一种不同寻常的折叠构象与环叠加。这是第一次观察到反应的一种酶,这种酶很可能与一个折叠紧凑的吡啶核苷酸。PheA2的晶体模型表明,活性外生时尚底物结合后的NADH裂NAD产品的发布。Nanoflow电喷雾质谱数据确实表明,PheA2可以绑定一个时尚代数余子式和一个时尚衬底。 In conclusion, the structural data provide evidence that PheA2 contains a dual binding cleft for NADH and FAD substrate, which alternate during catalysis.