KCC亚型在人类晶状体上皮细胞系(B3)和镜头组织提取物。

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Misri年代,Chimote AA, Adragna数控,Warwar R,布朗TL, Lauf PK

KCC亚型在人类晶状体上皮细胞系(B3)和镜头组织提取物。

Exp眼研究》2006年11月,83 (5):1287 - 94。Epub 2006 9月1。

PubMed ID

16949074 (在PubMed

]

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我们最近报道性转运蛋白活动在人类晶状体上皮细胞B3 (HLE-B3)。本研究的目的是为了证明在这些细胞以及在人类镜头组织性协同转运(KCC)亚型反向transcriptase-polymerase连锁反应(rt - pcr)、免疫印迹和免疫荧光显微镜。各自关注的四个已知基因编码蛋白质和拼接变体,rt - pcr与老鼠和人类预测cDNA片段的引物显示KCC1, KCC3a, KCC3b, KCC4但不是KCC2 HLE-B3细胞和人类晶状体组织提取物洪流的病人。多克隆兔(rb) anti-rat (rt)和反(hm)抗体rtKCC1 hmKCC3,分别和商用rb-anti-mouse (ms) KCC4抗体。Rb anti-rtKCC1-ECL3(对抗原表位的大型细胞外循环3 (ECL3)]显示150 kda乐队HLE-B3细胞与已知的KCC1分子量一致。Rb anti-hmKCC3-ECL3产生三个乐队150年、122年和105 kda,证据KCC3a, KCC3b甚至KCC3c亚型。122年和112年kda乐队也证明了rb anti-hmKCC3-CTD [c端域(CTD)]。Rb anti-msKCC4抗体只显示100 kda乐队HLE-B3细胞。人类晶状体组织,115 kda蛋白质检测和rb anti-rtKCC1-ECL3与rb anti-msKCC4 100 kda的乐队,但是,没有乐队和rb anti-hmKCC3-ECL3 rb anti-hmKCC3-CTD。荧光显微镜显示采用与anti-KCC1 HLE-B3细胞的细胞质膜和标签,-KCC3(激光共焦显微镜)和-KCC4抗体和Cy3-tagged二级抗体。 Hence HLE-B3 cells expressed proteins of the KCC1, KCC3a, b, and KCC4 isoforms, whereas surgically removed cataractous lens tissue expressed only those of KCC1 and KCC4.

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