外球面的乳杆菌诱变锰过氧化氢酶破坏集群核心。机械的影响。
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引用
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惠塔克MM, Barynin VV, Igarashi T,惠塔克JW
外球面的乳杆菌诱变锰过氧化氢酶破坏集群核心。机械的影响。
3月。2003欧元;270 (6):1102 - 16。
- PubMed ID
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12631270 (在PubMed]
- 文摘
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x射线晶体学nonheme锰过氧化氢酶的乳杆菌(LPC) [Barynin,教授惠塔克,M.M.、Antonyuk S.V.、Lamzin糖丸哈里森,点Artymiuk, P.J. &维特克J.W. Structure9(2001), 725 - 738年)显示的结构dimanganese集群及其蛋白氧化还原环境。(Mn (III)氧化锰(III)]集群是由两个溶剂分子桥接(分别含氧的和hydroxo)与微1,三桥接谷氨酸羧化物和嵌入在web涉及外部球体酪氨酸残基的氢键(Tyr42)。小说同源重组表达系统已经开发生产活跃LPC Tyr42已经取代苯丙氨酸使用定点诱变。光谱和结构研究表明,破坏氢键网络极大地扰乱Y42F LPC的活性部位,打破一个溶剂桥梁和生成一个“开放”形式的dimanganese集群。的两个金属配体晶体结构采用不同的构象,矫形器都有一个破碎的溶剂桥dimanganese核心。氧化Y42F LPC的展品强的光学吸收特性高自旋Mn (III)低对称和低配位数。MCD和电子顺磁共振测量提供补充信息定义一个ferromagnetically耦合电子基态集群包含单一溶剂桥,与本地集群包含的抗磁性基态发现一对溶剂的桥梁。Y42F LPC有不到5%的过氧化氢的过氧化氢酶活性和更高的公里(约1.4米),比WT LPC的中性pH值,虽然活动略有恢复在高pH值集群转化为一种抗磁性。 These studies provide new insight into the contribution of the outer sphere tyrosine to the stability of the dimanganese cluster and the role of the solvent bridges in catalysis by dimanganese catalases.