H121A突变体的结构和动力学分析胆固醇氧化酶。
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引用
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Lim L, Molla G, Guinn N, Ghisla年代,Pollegioni L, Vrielink
H121A突变体的结构和动力学分析胆固醇氧化酶。
j . 2006年11月15日,400 (1):13-22。
- PubMed ID
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16856877 (在PubMed]
- 文摘
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胆固醇氧化酶是一种单体的黄素酶的催化作用的氧化胆固醇cholest-4-en-3-one cholest-5-en-3-one其次是异构化。酶的枯草芽孢sterolicum包含时尚代数余子式His121共价结合。之前证明H121A替换导致大约100 mV减少中点氧化还原电位和转化率下降了约40倍比野生型酶[Motteran、Pilone Molla, Ghisla和Pollegioni(2001)生物化学杂志》上276年,18024 - 18030]。H121A突变酶的详细的动力学分析表明,周转率下降主要是由于相应减少的速率常数降低黄素,而re-oxidation反应略微改变,异构化反应不是替换和之前产品分离的影响。的x射线结构突变蛋白,决心解决1.7(1一致,0.1海里),揭示了只有微小的变化在整个折叠的蛋白质,即:两个循环有轻微的运动和一个色氨酸残基构象变化的旋转180度对chi1相比,本机酶。beplayapp比较异咯嗪环的一部分之间流行的代数余子式的本机和突变蛋白的结构显示改变从non-planar平面几何(导致它们更tetrahedral-like几何)。这种变化主要因素提出了观察到的氧化还原电势的改变。因为类似的失真黄素尚未观察到其他共价黄素蛋白,它代表一个特定的模式,提出了促进黄素共价胆固醇氧化酶的减少。