在线光学和x射线光谱和晶体学:一个集成的方法来确定金属蛋白结构功能定义良好的状态。
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埃利斯•乔丹Buffey SG,脚腕妈,哈斯南党卫军
在线光学和x射线光谱和晶体学:一个集成的方法来确定金属蛋白结构功能定义良好的状态。
J同步Radiat。2008年9月,15 (Pt 5): 433 - 9。doi: 10.1107 / S0909049508014945。Epub 2008年7月22日。
- PubMed ID
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18728313 (在PubMed]
- 文摘
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X-ray-induced氧化还原变化会导致不正确的作业功能的金属的金属蛋白晶体。在线监测的必要性的金属离子的状态(和其他发色团)在蛋白质晶体学实验越来越重要使用强烈的同步加速器x射线。全球重大努力因此被结合不同的光谱与x射线晶体数据收集。这里的实现和利用光学和x光吸收光谱在现代大分子晶体学(MX) beamline 10, SRS,位于达斯伯里实验室。这beamline配备一个专用单片能量色散x射线荧光检测器,使x光吸收光谱(xa)原位测量,在同一晶体用于记录衍射数据。此外,光学显微分光光度计beamline已经合并,从而促进MX, xa和光学光谱测量。通过结合这些技术还可以监视旋光的状态和光学沉默金属中心同时出现在一个水晶。这种独特的能力已经被应用于观察晶体数据收集的结果在晶体亚硝酸还原酶的产碱杆菌属xylosoxidans,其中包含1型和2型铜中心。发现1型铜中心photoreduces很快,导致的损失595纳米光学频谱峰值,而2型铜中心仍在氧化状态在一个相当长的一段时间,独立的确认是由xa数据作为该中心有一个难以觉察的光谱即使用微量分光光度测定法。这个例子清楚地演示了使用两个在线方法的重要性,光谱学和xa识别定义良好的氧化还原状态的金属离子在晶体数据收集。