使用MALDI-TOF质谱分析n -链糖肽的位点特异性糖谱:信号强度和糖型数量之间的强相关性。
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Thaysen-Andersen M, Mysling S, Hojrup P
使用MALDI-TOF质谱分析n -链糖肽的位点特异性糖谱:信号强度和糖型数量之间的强相关性。
化学学报。2009;31(10):3933-43。doi: 10.1021 / ac900231w。
- PubMed ID
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19358553 (PubMed视图]
- 摘要
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利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对n -链糖肽进行位点特异性糖谱分析是一项新兴技术，但其定量准确性缺乏文献记录。因此，对广泛不同的糖肽进行了系统的研究，以确定单个糖型的相对丰度与MALDI-TOF MS信号强度之间的关系。从含有中性聚糖(核糖核酸酶B、IgG和卵清蛋白)的糖蛋白中提取的糖肽最初进行了分析，并在与正常相HPLC 2-AB聚糖谱进行评估时获得了良好的可重复性定量(相关系数r = 0.9958, n = 5)。同样，使用质谱法对各种形式的n -聚糖(游离的、过甲基化的和荧光标记的)进行了精确定量。此外，对来自胎儿蛋白的三种不同的唾液糖肽进行了位点特异性分析，发现峰强度和相对丰度之间存在良好的相关性，只有少量唾液酸损失(r = 0.9664, n = 5)。一系列亲水性和石墨材料包装在微柱格式证明能够进行脱盐而不丢失定量信息，但突出了柱容量作为一个关键参数。总之，MALDI-TOF质谱信号强度可以准确地反映糖型的相对数量，前提是考虑到某些技术问题，即无偏样品处理、基质选择和仪器设置。这使得n -聚糖群体的快速和敏感的位点特异性糖谱分析能够促进生物标志物的发现和聚糖结构/功能关系的阐明。