oxyanion洞的功能和结构特征的高温酯酶Alicyclobacillus acidocaldarius。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
Mandrich L, Menchise V, V Alterio,德西蒙G, Pedone C,罗西M,曼科G
oxyanion洞的功能和结构特征的高温酯酶Alicyclobacillus acidocaldarius。
蛋白质。2008年6月,71(4):1721 - 31所示。
- PubMed ID
-
18076040 (在PubMed]
- 文摘
-
最近的诱变和分子模拟研究甘氨酸的作用84年提出的假定的oxyanion循环羧酸酯酶EST2从Alicyclobacillus acidocaldarius。酯酶催化活性的降低114倍G84S突变体的观察,没有热稳定性的变化。最近解决了三维(3 d) EST2结构在复杂的消息灵通的分子可以证明G84(连同G83和A156)参与的稳定oxyanion通过氢键的主链NH组。结构数据,在这种情况下不允许我们合理化突变的影响,因为这氢键突变预测是不变的。自从突变可能oxyanion循环的作用在奥软的家庭,实验来阐明机械的层面上观察到的k下降的原因(cat)设计。在这部作品中,动力学和结构特点G84S突变体的详细调查。最佳的温度和pH值的突变酶的活动被发现显著改变(T = 65摄氏度和pH = 5.75)。催化常数K (M)和V (max)突变被发现大大改变,与九倍增加14 K (M)和减少V (max),在pH值5.75。在pH值为7.1,下降k (cat)更引人注目。动力学常数的测量步骤的反应机理和突变的解决3 d结构提供了证据,观察到的部分原因是由于位阻影响S84-OH集团向酯基质和部分干扰水分子的亲核攻击第二个四面体中间。