半乳糖mutarotase的催化机理。
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Thoden JB,金正日J, Raushel调频,霍尔顿嗯
半乳糖mutarotase的催化机理。
蛋白质科学。2003;12 (5):1051 - 9。
- PubMed ID
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12717027 (在PubMed]
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半乳糖mutarotase催化第一步正常半乳糖代谢转化的催化beta-D-galactose alpha-D-galactose。酶的结构从Lactococcus lactis最近被解决在这个实验室和显示拓扑域5苷相似的。从这个初始的x射线分析,四个氨基酸残基被证明是密切参与糖结合蛋白:他96年,他170年,243年Asp, Glu 304。在这里,我们提出一个结合x射线晶体和动力学分析旨在检查的作用这些残留在酶的反应机理。对于这个调查,以下定点突变蛋白准备:H96N, H170N, D243N, D243A E304Q, E304A。所有的这些蛋白质的结构,口感与葡萄糖或半乳糖,解决名义1.95或更好的解决,对D-galactose及其动力学参数测量,葡萄糖,L-arabinose或D-xylose。从这些研究,可以得出结论,Glu 304和170是催化的关键,他96年和243年Asp对适当的衬底在活性位点定位很重要。具体来说,Glu 304作为活性部位基地启动反应通过移除质子的颈- 1羟基糖底物和他170年功能使质子化的活性部位酸c - 5环的氧气。