结构6-oxo樟脑水解酶H122A突变绑定到其自然产品,(2 s, 4 s) -alpha-campholinic酸:突变结构提出了一个非典型模式的过渡态绑定crotonase同族体。
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伦纳德点,杰罗甘G
结构6-oxo樟脑水解酶H122A突变绑定到其自然产品,(2 s, 4 s) -alpha-campholinic酸:突变结构提出了一个非典型模式的过渡态绑定crotonase同族体。
J生物化学杂志。2004年7月23日,279 (30):31312 - 7。2004年5月11日Epub。
- PubMed ID
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15138275 (在PubMed]
- 文摘
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crotonase同系物,6-oxo樟脑水解酶(哟),催化双环beta-diketones desymmetrization的光学活性的酮酸通过酶retro-Claisen反应,导致碳碳键的乳沟。我们之前报道的结构OCH(惠廷汉姆,j·L。、Turkenburg j . P。Verma c . S。沃尔什,m。甘,g(2003)生物。化学。278年,1744 - 1750),这表明五残留的参与,His-45, - 122, - 145, asp - 154,在催化和glu - 244。这里我们报告OCH突变研究,揭示H145A和OCH D154N突变体大大减少值k(猫)/ k (m)来自一个非常大的增加k (m)的本地衬底,6-oxo樟脑。此外,H122A大大减少值k (cat),及其k (m)是野生型的5倍。活性位点的位置由1.9——确认H122A结构突变的OCH包裹着的小非对映异构体(2 s, 4 s) -alpha-campholinic酸、酶的天然产品。这表明产品的吊坠醋酸氢连着他- 145 / asp - 154双的内环的羰基环戊烷环连着Trp-40氢。结果暗示base-catalyzed机制碳碳键的乳沟和提供线索的起源前手性的选择性的酶和招聘crotonase褶皱过渡态稳定的交替模式描述为其他crotonase总科成员。