EpiD的纯化和表征黄素蛋白参与的生物合成lantibiotic epidermin。
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Kupke T, Stevanovic年代,Sahl HG, Gotz F
EpiD的纯化和表征黄素蛋白参与的生物合成lantibiotic epidermin。
J Bacteriol。1992年8月,174 (16):5354 - 61。
- PubMed ID
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1644762 (在PubMed]
- 文摘
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epiD的plasmid-encoded epidermin生物合成基因,葡萄球菌epidermidis Tu3298表达在大肠杆菌利用男性融合系统和T7 RNA polymerase-promoter系统。EpiD是被西方墨点法(免疫印迹)anti-maltose-binding蛋白(MBP) -EpiD抗血清。EpiD和MBP-EpiD融合蛋白,主要存在于可溶性蛋白质分数,从各自的大肠杆菌克隆纯化。纯化EpiD显示典型的氧化黄素蛋白的吸收光谱与最大值为274,382和453海里。热处理的辅酶EpiD释放被确认为黄素单核苷酸。美国epidermidis Tu3298 / EMS11 epiD内包含一个突变,无法合成活性epidermin。epiD *,这种突变基因在大肠杆菌克隆,表达了作为一个MBP-EpiD *融合蛋白。DNA测序epiD *确定一个点突变,导致更换g - 93与Asp。不像MBP-EpiD,融合蛋白MBP-EpiD *不能绑定黄素单核苷酸。我们建议EpiD催化的两个减少等价物C端meso-lanthionine半胱氨酸残基的形成——C = = C双键,因此参与形成的不同寻常的S - [(Z) 2-aminovinyl [-D-cysteine epidermin结构。