研究的活性位点残基糖苷水解酶家族八木聚糖酶。
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柯林斯T,德·沃斯·D, Hoyoux Savvides SN, Gerday C, Van Beeumen J,樵夫G
研究的活性位点残基糖苷水解酶家族八木聚糖酶。
J杂志。2005年11月25日,354 (2):425 - 35。Epub 2005 10月10。
- PubMed ID
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16246370 (在PubMed]
- 文摘
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定点诱变和动力学参数的对比描述,pH值依赖突变体和野生型酶的活性和热稳定性与晶体用于协会分析来描述几个活性位点残基的功能在一个小说糖苷水解酶家族八木聚糖酶。每个残留研究中扮演着重要的角色在这个酶:E78一般酸,D281的通用基础和定位亲核的水分子,Y203维持水分子亲核的位置和结构完整性和D144糖环扭曲和过渡状态稳定。有趣的是,尽管pH-activity晶体结构分析和概要文件清楚地识别功能E78 D281,替换这些残留的酰胺衍生品的结果只有一个250倍和700倍的减少他们的明显的k (cat)值,分别。这个,除了观察,提出通用基础不是守恒的糖苷水解酶家族8酶,表明这个家庭的机械架构反相酶比通常认为的更加复杂和指向一个多样性的机械化的身份重要的残留物以及活性部位的复杂的微环境的安排在这个家庭的成员。