p-Aminobenzoate大肠杆菌的生物合成。净化pabC aminodeoxychorismate裂合酶和克隆。
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绿色JM,尼科尔斯BP
p-Aminobenzoate大肠杆菌的生物合成。净化pabC aminodeoxychorismate裂合酶和克隆。
生物化学杂志。1991年7月15日;266 (20):12971 - 5。
- PubMed ID
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2071583 (在PubMed]
- 文摘
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p-Aminobenzoate维生素叶酸的一个组成部分,是七个化合物来源于芳香前体chorismate大肠杆菌。历史上的基因产物pabA和pabB被认为是足够的对于新创p-aminobenzoate生物合成。然而,最近的研究表明,这些蛋白质不恒等的子单元的单一酶,作用于chorismate形成扩散的中间,最有可能4-amino-4-deoxychorismate。这中间又会转化成p-aminodeoxychorismate裂合酶(尼科尔斯,b P。Seibold, a。Doktor, s . z(1989)生物。264年化学,8597 - 8601)。这里我们描述中间的部分特征和净化aminodeoxychorismate裂合酶4100倍附近的同质性。这种酶的进一步净化高压液相色谱法允许隔离的纯样品产生n端序列。64倍冗余寡核苷酸探针被用来确定一个λ包含基因编码aminodeoxychorismate裂合酶的克隆。指定pabC aminodeoxychorismate裂合酶基因是映射到25分钟在大肠杆菌染色体上,位于一对7.5千碱基EcoRI片段。 A strain harboring a pACYC184 recombinant containing pabC overproduced aminodeoxychorismate lyase activity 77-fold.