重组体人胞质唾液酸酶的属性HsNEU2。酶水解monomerically分散GM1神经节苷脂分子。
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Tringali C,帕皮尼N、副食P,橘黄色G, Borsani G, Preti, Tortora P, Tettamanti G, Venerando B,蒙蒂E
重组体人胞质唾液酸酶的属性HsNEU2。酶水解monomerically分散GM1神经节苷脂分子。
J生物化学杂志。2004年1月30日,279 (5):3169 - 79。Epub 2003年11月12日。
- PubMed ID
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14613940 (在PubMed]
- 文摘
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重组体人胞质唾液酸酶(HsNEU2),大肠杆菌中表达,纯化同质性,及其底物专一性进行了研究。HsNEU2水解4-methylumbelliferyl alpha-NeuAcα2 - - > 3 sialyllactose,糖蛋白(胎球蛋白,alpha-acid糖蛋白、转铁蛋白和牛颌下腺粘蛋白),胶束神经节甘脂GD1a, GD1b, GT1b,α2 - - > 3 paragloboside,水泡GM3。α2 - - > 6 sialyllactose colominic酸,GM1低聚糖,而胶束GM2和GM1是耐药。的最佳pH值为5.6,动力学Michaelis-Menten类型、V (max)不同从250 IU /毫克蛋白(GD1a) 0.7 IU /毫克蛋白(α(1)酸性糖蛋白),和K (m)在毫克分子范围内。HsNEU2激活了洗涤剂(Triton x - 100)只有gangliosidic基质;从水泡GM3混合胶束聚合的变化导致了V (max)增加8.5倍。神经节甘脂HsNEU2行动(GM1 GD1a, GM2)摩尔浓度。与这些分散体(GM1在详细研究),在单体绑定到管壁或无力地关联(1:20 00,摩尔/摩尔)特里同x - 100胶束,V (max)值是25和72 microIU /毫克的蛋白质,和K (m) 10和15 x 10 (9) m,分别。值得注意的是,GM1和GM2公认的单体。HsNEU2 pH值在7.0的效率(与之相比,在pH值5.6)从4% (GD1a)到64%(α(1)酸性糖蛋白),从7% (GD1a)到45% (GM3)在特里同x - 100和30 - 40% GM1单体的扩散。 These results show that HsNEU2 differentially recognizes the type of sialosyl linkage, the aglycone part of the substrate, and the supramolecular organization (monomer/micelle/vesicle) of gangliosides. The last ability might be relevant in sialidase interactions with gangliosides under physiological conditions.