的核苷酸序列,克隆和表达3-methylaspartate ammonia-lyase基因枸橼酸杆菌属amalonaticus应变yg - 1002。
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加藤Y,浅野Y
的核苷酸序列,克隆和表达3-methylaspartate ammonia-lyase基因枸橼酸杆菌属amalonaticus应变yg - 1002。
生物科技:Microbiol》。1998年10月;(4):468 - 74。
- PubMed ID
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9830098 (在PubMed]
- 文摘
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基因编码3-methylaspartate ammonia-lyase (MAL 3-methylaspartase, EC 4.3.1.2)柠檬酸杆菌属amalonaticus应变yg - 1002 (TPU 6323)是克隆到质粒pBluescript II k(+)和核苷酸序列1239 - bp的开放阅读框(ORF),组成的413密码子,被确认为MAL基因编码发作。预测多肽有62.5%的身份与专性厌氧微生物的发作,梭状芽孢杆菌tetanomorphum NCIMB 11547。ORF1显示,58.6%和58.8%的身份与谷氨酸变位酶的亚基E c分别tetanomorphum和cochlearium梭状芽胞杆菌,mal基因的上游地区被发现。表达质粒pMALCA3 (5.4 kb), mal基因表达的控制的虫胶子向量,构造。喂养的1毫米beta-D-thiogalactopyranoside异丙酯,在提取游离酶的转化株、大肠杆菌JM109 / pMALCA3,升高到51800单位/ l文化,大约50倍的c . amalonaticus应变yg - 1002。beplayapp是计算酶由提取细胞总蛋白的40%以上。产生的酶大肠杆菌转化株纯化结晶形式,证明是相同的野生型菌株对特定活动,分子质量,亚基结构,enzymological属性和n端氨基酸序列。