的表达、纯化和表征AknX蒽酮加氧酶,参与aklavinone生物合成在链霉菌属galilaeus。
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钟司法院,藤井裕久我Harada年代,Sankawa U, Ebizuka Y
的表达、纯化和表征AknX蒽酮加氧酶,参与aklavinone生物合成在链霉菌属galilaeus。
J Bacteriol。2002年11月,184(22):6115 - 22所示。
- PubMed ID
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12399480 (在PubMed]
- 文摘
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在链霉菌蒽环霉素生物合成基因簇,小型开放阅读框架位于上游的最小酮化合物合酶基因。aknX是这样一个基因中发现aklavinone-aclacinomycin生物合成基因簇的链霉菌属galilaeus。为了确定其功能,aknX基因在大肠杆菌表达。细胞从大肠杆菌中提取制备细胞overexpressing AknX蛋白质表现出蒽酮加氧酶活动,转换emodinanthrone蒽醌大黄素。这表明AknX DnrG等相关基因产物和SnoaB参与aklanonic酸性蒽酮的前体的形成,所显示与TcmH和ActVA6的同源性。AknX蛋白融合他的(6)标记被倪有效地净化同质性(2 +)亲和力和阴离子交换柱层析法。本机的分子质量AknX被凝胶过滤估计42 kDa。因此,本机AknX认为homotrimeric亚基结构。AknX TcmH和ActVA6一样,拥有没有明显的辅基氧活化。定点诱变进行识别的关键氨基酸残基(s)参与氧化反应。 Of seven AknX mutants expressed, the W67F mutant showed significantly reduced oxygenase activity, suggesting the important role of the W67 residue in the AknX reaction. A possible mechanism for the reaction via peroxy anion intermediate is proposed.