发散的5 '末端的人类叶酸受体α(hFR) mrna源自两个组织发起人和可变剪接:αhFR基因结构的表征。
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埃尔伍德PC, Nachmanoff K, Saikawa Y,页面圣,帕切科P,罗伯茨年代,钟KN
发散的5 '末端的人类叶酸受体α(hFR) mrna源自两个组织发起人和可变剪接:αhFR基因结构的表征。
生物化学,1997年2月11日,36 (6):1467 - 78。
- PubMed ID
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9063895 (在PubMed]
- 文摘
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人类KB细胞或叶酸受体α(阿尔法hFR)是42 kDa的膜糖蛋白,参与的叶酸的内化和抗。七个独立的αhFR cDNA亚型含有独特的5 '末端也有报道,但有共同的开放阅读框(ORF)。调查这些异构的分子基础5 '序列,我们确定αhFR基因的序列从两个克隆从人类分离淋巴细胞λDASH基因组文库。基因是由7个外显子,跨度6.8 kb。的ORF编码外显子4到7的报道5 '末端cDNA亚型(包括两个指定KB2小说的互补和KB4)是由外显子编码1到4。使用核糖核酸酶保护化验,我们证明,成绩单KB1对应和KB4互补dna来自上游启动子从第1外显子,外显子4指定的P1和P4,分别,这些信使rna亚型表达最丰富的成绩单在癌细胞和选择正常组织(包括肾脏、肺、小脑)。我们观察到一个异构开始网站在P1的外显子1启动子在P4启动子转录的来自一个网站。此外,我们发现P1和P4的组织特异性启动子的利用率。记录来自P1表达的启动子是最丰富的记录人类小脑和肾脏。相比之下,P4启动子的转录表达最丰富的成绩单由人类KB细胞和肺。 Total RNA from KB cells also protects a 66 bp fragment of an exon 3 riboprobe that is consistent with an alternatively spliced transcript. To examine the functional activity of the predicted P1 and P4 promoters, alpha hFR promoter-CAT chimeric plasmids were constructed using sequences flanking exon 1 and exon 4. We observed a 7.5- and 10-fold increase in CAT activity in HeLa cells transiently transfected with the P1 and P4 promoter constructs, respectively. These data demonstrate that a single gene encodes the divergent 5' termini of the alpha hFR cDNAs and that the alpha hFR transcripts are transcribed from two promoters that are activated in a tissue-specific manner.