Ala657和守恒的活性位点残基促进成纤维细胞激活蛋白肽链内切酶活动通过不同机制的过渡状态稳定。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
草地SA Edosada CY, Mayeda M, Tran T,全C, H,拉布Wiesmann C,狼BB
Ala657和守恒的活性位点残基促进成纤维细胞激活蛋白肽链内切酶活动通过不同机制的过渡状态稳定。
生物化学。2007年4月17日,46 (15):4598 - 605。Epub 2007年3月24日。
- PubMed ID
-
17381073 (在PubMed]
- 文摘
-
成纤维细胞激活蛋白(FAP)和dipeptidyl peptidase-4 (DPP-4)是高度同源prolyl肽酶的丝氨酸蛋白酶家族和治疗癌症和糖尿病的目标,分别。两种蛋白酶显示dipeptidyl肽酶活性,但仅凭FAP肽链内切酶的活动。FAP Ala657,对应于DPP-4 Asp663,肽链内切酶的活动是很重要的;然而,它的具体作用尚不清楚,它是未知是否守恒DPP-4衬底绑定残留支持FAP肽链内切酶的活动。使用定点诱变和动力学分析,我们在这里展示Ala657和五个守恒的活性位点残基(Arg123, Glu203, Glu204、Tyr656 Asn704)促进FAP肽链内切酶活动通过不同机制的过渡状态稳定(TSS)。能量守恒的残留提供显著的TSS肽链内切酶和dipeptidyl肽酶底物,和结构建模支持其功能绑定两个基板。Ala657也稳定肽链内切酶底物绑定和另外规定FAP反应过渡态抑制剂,允许紧密互动四面体中间类似但不是酰基酶类似物。相反,DPP-4 Asp663稳定dipeptidyl肽酶底物结合紧密的交互与过渡态类似物和许可。结构建模表明,FAP Ala657和DPP-4 Asp663赋予他们的对比影响TSS调制守恒的残留FAP Glu204的构象和DPP-4 Glu206。FAP因此需要Ala657和守恒的残留的组合功能肽链内切酶的活动。