的结构和动力学分析人类成纤维细胞激活蛋白α的底物特异性。
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斯奈尔施Aertgeerts K,莱文,L, GP,詹宁斯,普拉萨德GS、张Y,克劳斯ML, Salakian年代,bloom V, Wijnands R,坦南特毫克
的结构和动力学分析人类成纤维细胞激活蛋白α的底物特异性。
生物化学杂志。2005年5月20日;280 (20):19441 - 4。Epub 2005年4月4。
- PubMed ID
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15809306 (在PubMed]
- 文摘
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成纤维细胞激活蛋白α(FAPalpha)是上皮肿瘤中高度表达,参与细胞外基质重塑,肿瘤的生长和转移。我们提出第一个酶蛋白高分辨率结构以及动力学数据向小二肽基板。FAPalpha展品dipeptidyl肽酶IV (DPPIV)例如折叠,以一个α/ beta-hydrolase域和一个eight-bladed beta-propeller域。已知DPPIV二肽是由FAPalpha裂解催化效率下降约100倍而DPPIV。此外,FAPalpha,但不是DPPIV,具有肽链内切酶活性对氨基端benzyloxycarbonyl阻塞肽(Z)。比较FAPalpha的晶体结构和DPPIV透露的一个主要区别在附近Glu主题(Glu (203) -Glu FAPalpha (204);Glu (205) -Glu DPPIV(206))在酶的活性部位。在FAPalpha阿拉巴马州(657),而不是Asp(663)在DP-PIV,减少这个口袋里的酸度,这种变化可以解释FAPalpha低亲和力n端胺。这个假设被动态测试分析突变FAPalpha / A657D,显示平均约60倍增加催化效率,以k(猫)/ k (m),对二肽基板的乳沟。此外,突变体的催化效率也会减少约350倍Z-Gly-Pro-7-amino-4-methylcoumarin的乳沟。 Our data provide a clear understanding of the molecular determinants responsible for the substrate specificity and endopeptidase activity of FAPalpha.