建设和描述包含序列的重组质粒DNA噬菌体φX174 DNA复制的起源。
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Heidekamp F,主人PD,范繁荣JH, Veeneman GH, Zipursky SL, Jansz h
建设和描述包含序列的重组质粒DNA噬菌体φX174 DNA复制的起源。
核酸研究》1981年7月24日,9 (14):3335 - 54。
- PubMed ID
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6269080 (在PubMed]
- 文摘
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合成DNA片段(公式,看到文本)(相应的核苷酸φ4299 - 4314 X DNA序列)被克隆到AmpR基因或基因的质粒pACYC KmR 177。KmR基因的DNA序列的插入网站是由核苷酸序列分析177年pACYC FnudII限制DNA片段N6 (345 b.p)。五选定的质粒DNA,包含插入DNA序列的抗生素抗性基因,周围的核苷酸序列,这些序列被确定。两个重组质粒(pFH 704和pFH 614)包含hexadecamer序列串联(tail-to-tail和tail-to-head)。812年的重组质粒pFH pFH 903年和807年pFHφX的DNA序列同源性起源地区14(4300 - 4313),16号(4299 - 4314)和20个核苷酸(4299 - 4318),分别。没有一个重组质粒dna超螺旋带切口的孵化与φX基因的蛋白质。此外,重组质粒RFI DNA不能作为替代品φX RFI体外(+)的DNA链合成系统。早些时候已被证明,单链DNA,其中包含decamer序列CAACTTGATA是有效地偷走了φX基因的蛋白质。目前的结果表明,轻伤的双链超螺旋DNA核苷酸序列同源性与φX起源地区20多个核苷酸是必需的。这些结果表明φX RF DNA复制起始模型,其中包括识别序列的存在CAACTTGATAφX基因的蛋白质以及第二特定核苷酸序列所需的绑定φX基因的蛋白质。 This binding causes local unwinding of the DNA double helix and exposure of the recognition sequence in a single-stranded form, which then can be nicked by phi X gene A protein.