钙释放钙调蛋白及其c端或氨基端部分存在的钙调素拮抗剂酚苄明和蜂毒肽stopped-flow荧光测量的五胞胎2和内在酪氨酸。calmodulin-dependent蛋白激酶的抑制心脏肌浆网。
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Suko J, Wyskovsky W, Pidlich J, Hauptner R,木板B,张春G
钙释放钙调蛋白及其c端或氨基端部分存在的钙调素拮抗剂酚苄明和蜂毒肽stopped-flow荧光测量的五胞胎2和内在酪氨酸。calmodulin-dependent蛋白激酶的抑制心脏肌浆网。
欧元。1986年9月15日,159 (3):425 - 34。
- PubMed ID
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3758070 (在PubMed]
- 文摘
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钙分离从c端和钙调蛋白的氨基端部分,完整的牛脑钙调蛋白和各自的复合物或酚苄明蜂毒肽复合物直接测量stopped-flow荧光钙螯合剂的五胞胎2和,如果可能,也通过使用内源性酪氨酸荧光蛋白荧光和EGTA混合。钙调蛋白c端一半的钙分离,只包含两个高亲和性钙结合网站,从完整的钙调蛋白是单相,具有良好相关性的钙分离两种方法获得的。明显的五胞胎2和内源性酪氨酸荧光13.4 s - 1和12.8 s - 1,分别在C端一半10.5 s - 1和10.8 s - 1,分别在完整的钙调蛋白(pH值7.0,25摄氏度,100毫米氯化钾)。烷基化的c端一半导致两相的钙离解(五胞胎2:水1.90分别s - 1和0.73 s - 1;分别酪氨酸:水1.65 s - 1和0.61 s - 1)。烷基化完整的钙调蛋白导致一个四阶段钙分离测量2五胞胎(s - 1 s - 1水85.3,11.1,1.92 s - 1和0.59 s - 1);后两个阶段被认为代表钙释放的高亲和性网站因为他们对应的两相的酪氨酸荧光变化完整的烷基化钙调蛋白(水2.04分别s - 1和0.53 s - 1)和速度参数确定c端一半。显然扰动钙结合网站的烷基化减少钙分解的速度,并允许离解的之间的区别这两个网站的高亲和性以及不同的构象变化对每个钙的离解。烷基化的氨基端一半导致两相的钙释放率(分别水153 s - 1和10.9 s - 1)在完整的烷基化钙调蛋白所观察到的类似。钙离子离解的利率calmodulin-melittin或fragment-melittin复合物,测量2五胞胎,慢和单相c端一半(水1.12 s - 1),两相的氨基端一半的分别(水140 s - 1和26.8 s - 1)和三相的完整的钙调蛋白(s - 1水126,12.1 s - 1和1.38 s - 1)。 Calmodulin antagonists thus increase the apparent calcium affinity of high and low-affinity sites mainly due to a reduced calcium 'off rate', presumably because of conformation restrictions.(ABSTRACT TRUNCATED AT 400 WORDS)