人类垂体类胰蛋白酶:分子形式,NH2-terminal序列,采用本地化和特异性与激素原fluorogenic基质。
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Cromlish是的,Seidah NG Marcinkiewicz M,哈梅林J,约翰逊哒,克雷蒂安M
人类垂体类胰蛋白酶:分子形式,NH2-terminal序列,采用本地化和特异性与激素原fluorogenic基质。
J生物化学杂志。1987年1月25日,262 (3):1363 - 73。
- PubMed ID
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3543004 (在PubMed]
- 文摘
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人类pituitary-derived丝氨酸蛋白酶,免疫与人类肺类胰蛋白酶(t . J。史密斯荷格兰德,分子量约翰逊,D.A.(1984)生物。259年化学,11046 - 11051),发现免疫组织化学与在垂体结缔组织肥大细胞存在。西方墨点法结合钠十二烷基sulfate-polyacrylamide凝胶电泳显示的存在多种形式:主要先生36300形式和三个次要形式先生32400年,33400年和34600年。两种主要形式与35600年和34100年被先生与125 i-d-tyr-glu-phe-lys-arg-ch2cl亲和标签。治疗的垂体类胰蛋白酶准备N-glycosidase F表示,一些分子量异质性结果N-linked糖基化。多个分子量相同形式似乎NH2-terminal序列:Ile-Val-Gly-Gly-Gln-Glu-Ala-Pro。垂体类胰蛋白酶具有明显= 110000先生通过对交联葡聚糖凝胶过滤g - 200的0.3 M氯化钠,表明酶可能是先生的四聚物= 32400 - 36300单元。然而,这四级结构不稳定的梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳。人垂体类胰蛋白酶是如此反应对合成三肽coumarin-containing基质包含一对等基本氨基酸的乳沟benzyloxylcarbonyl-L-Ala-L-Lys-L-Arg-4-methylcoumarin-7-amide (k猫/公里= 2.38 X 10 (8) m - 1 s - 1) Briggs-Haldane动力学可能适用。 The reversible inhibitor NaCl at a concentration of 1 M decreased the k cat/Km for benzyloxylcarbonyl-L-Ala-L-Lys-L-Arg-4-methylcoumarin-7-amide to 6.53 X 10(6) M-1 s-1, which reflected a 100-fold increase in apparent Km. Based on active site titration with fluorescein mono-p-guanidinobenzoate hydrochloride, NaCl had no effect on the number of accessible active sites. Substrate specificity studies with prohormones indicated that pituitary tryptase has a preference for cleaving COOH-terminal to arginine or lysine residues which are preceded by a proline residue 4 or 6 residues NH2-terminal to the site of cleavage.