细菌代谢萘:建设和使用重组细菌研究环解理,2-dihydroxynaphthalene和随后的反应。
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伊顿RW,查普曼PJ
细菌代谢萘:建设和使用重组细菌研究环解理,2-dihydroxynaphthalene和随后的反应。
J Bacteriol。1992年12月,174 (23):7542 - 54。
- PubMed ID
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1447127 (在PubMed]
- 文摘
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萘的反应参与细菌新陈代谢的水杨酸重新调查了使用细菌携带基因重组质粒NAH7克隆的。当完整细胞的铜绿假单胞菌PAO1携带DNA片段编码的前三个酶通路与萘孵化,他们成立了dioxygenase-catalyzed环劈理的产品1,2-dihydroxynaphthalene。这些产品在交联葡聚糖色谱分离G-25和通过1 h和13 c核磁共振光谱、气相色谱-光谱法2-hydroxychromene-2-carboxylate (HCCA)和trans-o-hydroxybenzylidenepyruvate (tHBPA)。HCCA检测产品在这些孵化第一反应混合物的紫外光谱特征,慢慢地变成一个光谱表明一个平衡HCCA和tHBPA的混合物。异构化的纯化产品发生缓慢而自发地给一个平衡基本相同的成分的混合物。从HCCA tHBPA也形成一种异构酶酶的作用由质粒编码NAH7。这种酶的基因编码,nahD,克隆在1.95 kb KpnI-BglII片段。提取的大肠杆菌JM109携带这个片段催化的快速平衡HCCA tHBPA。新陈代谢的tHBPA水杨醛水合作用和醇醛乳沟是由一个单一的酶催化的编码由1 kb MluI-StuI限制片段。提出了hydratase-aldolase-catalyzed反应机制。 The salicylaldehyde dehydrogenase gene, nahF, was cloned on a 2.75-kb BamHI fragment which also carries the naphthalene dihydrodiol dehydrogenase gene, nahB. On the basis of the identification of the enzymes encoded by various clones, the gene order for the nah operon was shown to be p, A, B, F, C, E, D.