人f1 - atp酶:β亚基cDNA的分子克隆。
文章的细节
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引用
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太田,香川勇
人f1 - atp酶:β亚基cDNA的分子克隆。
生物化学杂志,1986年1月;99(1):135-41。
- PubMed ID
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2870059 (PubMed视图]
- 摘要
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f1 -ATP酶是ATP合成的主要酶,其β亚基是催化位点。到目前为止,真核生物F1基因的全长cDNA还没有报道。人类F1在医学和细胞生物学中具有重要意义。在这里,我们报道了人类F1 β亚基全长cDNA的分子克隆和纯化的人类F1 β亚基。以表达载体gt11为载体构建HeLa细胞cDNA文库,并用抗酵母F1 β亚基血清进行筛选。采用双脱氧链终止法对其中一个含有人类F1 β基因的阳性噬菌体dna及其侧翼区(1.8千碱基对)进行了测序。开放阅读框从一个假定的信号序列开始,该序列富含丝氨酸和精氨酸。人鸟氨酸经氨基氨基酰基化酶的信号前序列与F1 β的信号前序列存在同源片段。F1 β前体在含有T5启动子和F1 β cDNA构建的质粒的大肠杆菌中表达。在脉冲追踪实验中,在HeLa细胞中检测到F1 β的前体和成熟形式。 The amino acid sequence of 480 residues (51,568.3 daltons) following the presequence was highly homologous with that of mature beef heart F1 beta (97.5%) and E. coli F1 beta (71.7%), but the codon usage in the human gene was very different from those of reported genes coding for F1 beta of other species.