诱变的锌配位体残渣Cys221揭示IMP-1金属-β-内酰胺酶活性部位的可塑性。
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霍顿磅,夏克尔年代,Mikulski R,布朗NG,菲利普斯KJ, Lykissa E,普拉萨德Venkataram BV, Palzkill T
诱变的锌配位体残渣Cys221揭示IMP-1金属-β-内酰胺酶活性部位的可塑性。
Antimicrob代理Chemother。2012年11月,56 (11):5667 - 77。doi: 10.1128 / AAC.01276-12。Epub 2012 8月20。
- PubMed ID
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22908171 (在PubMed]
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金属-β-内酰胺酶催化水解的广泛的beta-lactam抗生素和关心耐药性的传播。分析酶结构和功能的决定因素,子类的序列要求B1 IMP-1 beta-lactamase锌结合残留物Cys221被饱和突变检测和评估蛋白表达,以及beta-lactam底物的水解。结果表明,大多数替换在221位置不稳定的酶。只包含C221D和C221G替换表达的酶在大肠杆菌和表现出催化活性beta-lactam抗生素。尽管缺乏金属络合集团在221位置,C221G酶表现出较高的催化活性的外源性锌。分子建模表明,甘氨酸替换替换中是独一无二的,完整切除半胱氨酸为水分子侧链允许空间取代硫醇和协调在Zn2锌锌结合位点来恢复功能。多个方法被用来估计C221G Zn2绑定常量是17至43妈妈。对大肠杆菌体内酶功能的研究基本培养基上生长显示IMP-1和C221G突变体表现出妥协活动时锌可用性很低。最后,替换121残渣,IMP-1相当于子类B3 zinc-chelating位置,未能拯救C221G函数,提出协调方案,B1和B3子类不可以互换。