核糖体基因中断极端嗜热生物栖热菌属酸奶HB8。代突变缺乏核糖体蛋白肌力。
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Simitsopoulou M,阿维拉H, Franceschi F
核糖体基因中断极端嗜热生物栖热菌属酸奶HB8。代突变缺乏核糖体蛋白肌力。
12月。1999欧元;266 (2):524 - 32。
- PubMed ID
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10561594 (在PubMed]
- 文摘
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肌力是一种初级rRNA-binding蛋白已与核糖体的组装和转化忠诚。我们描述的生成和生化特征肌力-核糖体突变体,核糖体protein-lacking突变获得在栖热菌属酸奶HB8。肌力突变体是通过插入目标基因的失活与卡那霉素腺嘌呤转移酶(kat)基因,利用一个Thermus-Escherichia穿梭载体和自然栖热菌属的变换。最后构建用于转换栖热菌属细胞,肌力编码区是替换为kat基因克隆在坐标系与肌力的前三个氨基酸。因此,体内kat基因的转录是核糖体操纵子启动子的控制下。在大肠杆菌中,栖热菌属肌力热敏表型变异展出。二维页面、免疫印迹和ELISA证实没有突变核糖体的肌力。Sucrose-gradient突变细胞的资料显示一个清晰的分离和正常比例的50年代和30年代子单元以及它们之间正常的比率。此外,肌力变异显示20年代的峰值代表assembly-defective粒子。成功的源地释放的蛋白质肌力表现到突变核糖体展示时调整与孤立的肌力在60摄氏度。