用户负载SlipChip之中的多路复用nanoliter-scale实验。
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李,杜W, Ismagilov R
用户负载SlipChip之中的多路复用nanoliter-scale实验。
J是化学Soc。2010年1月13日,132(1):106 - 11所示。doi: 10.1021 / ja908555n。
- PubMed ID
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20000708 (在PubMed]
- 文摘
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介绍了微流体的方法进行多路复用nanoliter-scale实验结合样本与多个不同的试剂,每个在多个混合比率。这种方法使用了一个用户负载,之中SlipChip。混合比率,以稀释荧光染料,可以控制体积每个组合的井。SlipChip设计验证大约12问规模的结晶条件筛选glutaryl-CoA脱氢酶从洋葱举办对48个不同的试剂;每个试剂测试在11个不同的混合比例,528年总结晶试验。蛋白质样品的总消费大约是10 microL。成功地确定了结晶条件。结晶实验成功地扩大使用条件中确定SlipChip孔板。晶体是由x射线衍射特征,提供了一个蛋白质结构在不同的空间群和更高的分辨率比常规方法得到的结构。在这个工作,这个用户负载SlipChip被证明能可靠地处理流体的各种物理化学性质,如粘度和表面张力。 Quantitative measurements of fluorescent intensities and high-resolution imaging were straighforward to perform in these glass SlipChips. Surface chemistry was controlled using fluorinated lubricating fluid, analogous to the fluorinated carrier fluid used in plug-based crystallization. Thus, we expect this approach to be valuable in a number of areas beyond protein crystallization, especially those areas where droplet-based microfluidic systems have demonstrated successes, including measurements of enzyme kinetics and blood coagulation, cell-based assays, and chemical reactions.