人类细胞中多种形式的聚(A)聚合酶。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
张建军，张建军，张建军，张建军
人类细胞中多种形式的聚(A)聚合酶。
科学通报，1994(2):1 - 7。
- PubMed ID
-
8302877 (PubMed视图]
- 摘要
-
我们在大肠杆菌中克隆了人多聚A聚合酶(PAP) mRNA作为cDNA。测定了该mRNA的一级结构，并与牛PAP mRNA序列进行了比较。这两个序列在核苷酸水平上的相似性为97%，在氨基酸水平上的相似性为99%。代表重组PAP的多肽在大肠杆菌中表达，纯化，并作为抗原产生单克隆抗体。使用这些单克隆抗体作为探针进行Western blot分析，在HeLa细胞提取物中发现了三个PAPs，估计分子质量为90、100和106 kDa。HeLa细胞的分离结果表明，90 kda的多肽为细胞核，而100和106 kda的多肽在细胞核和细胞质中都存在。106 kda的PAP很可能是100 kda的一种磷酸化衍生物。用纯化的重组人PAP体外恢复PAP活性。随后的突变分析表明，PAP的N端和c端区域对活性都很重要，并表明切割和聚腺苷化特异性因子(CPSF)与PAP的c端区域相互作用。有趣的是，在该区域发现了初步的磷酸化位点，表明磷酸化/去磷酸化可能调节两种聚腺苷化因子PAP和CPSF之间的相互作用。