cDNA克隆,表达人类6-pyruvoyl-tetrahydropterin合酶在大肠杆菌和净化。
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太空,畠山直哉K, Kagamiyama H
cDNA克隆,表达人类6-pyruvoyl-tetrahydropterin合酶在大肠杆菌和净化。
生物化学Biophys Res Commun。1993年9月30日,195 (3):1386 - 93。
- PubMed ID
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8216273 (在PubMed]
- 文摘
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cDNA克隆人类6-pyruvoyl-tetrahydropterin合成酶,第二个酶的生物合成途径中四氢生物蝶呤,被孤立的人类Molt-4细胞cDNA图书馆通过与一只老鼠cDNA交叉融合。一个cDNA克隆包含整个编码435个碱基对的序列。大肠杆菌表达的互补脱氧核糖核酸是利用表达载体pMAL与maltose-binding融合蛋白的蛋白质。通过其maltose-binding亲和纯化蛋白质域后,融合蛋白消化了Xa因素在特定域之间的裂解位点插入。本机的主要产品是一种蛋白质分子质量90 kDa, 17 kDa的亚基分子量和分子质量及其动力学性质类似的人类肝脏酶纯化。