人微粒体环氧化物水解酶基因变异的功能分析。
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Hosagrahara VP, Rettie AE, Hassett C, Omiecinski CJ
人微粒体环氧化物水解酶基因变异的功能分析。
化学与生物学报。2004;11(2):149-59。
- PubMed ID
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15535985 (PubMed视图］
- 摘要
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人微粒体环氧化物水解酶(EPHX1)在许多潜在致癌或其他遗传毒性环氧化物的代谢中很活跃，例如来自多芳烃氧化的环氧化物。EPHX1具有多态性，编码至少两个氨基酸位置的等位基因变异，即Y113H和H139R。在最近的一些分子流行病学调查中，EPHX1多态性已被认为是几种人类疾病的易感因素。为了更好地评估EPHX1遗传多态性的功能贡献，我们表征了与每个变体蛋白相关的酶特性。用顺式二苯乙烯氧化物(cSO)和苯并[a]芘-4,5-环氧化合物(BaPO)这两种水解酶的原型底物对酶谱进行了评价。在一系列实验中，利用pFastbac杆状病毒载体在Sf9 (Spodoptera frugiperda-9)昆虫细胞中表达EPHX1重组蛋白，并进行柱层析纯化，分析其活性。在平行研究中，用已知EPHX1基因型个体的人肝微粒体评估了EPHX1的活性。使用纯化的蛋白制剂，参考蛋白Y113/H139的cSO和BaPO水解率比其他EPHX1等位基因变体高约2倍。然而，当使用人肝微粒体组分分析活性时，代表不同EPHX1等位基因的制剂在反应率上没有明显的差异。总之，这些结果表明Y113H和H139R变异等位基因编码的结构差异对体内ephx1特异性酶活性的影响不大。