磷酸化筛选识别翻译起始因子4 gii Ca的细胞内目标(2 +)/ calmodulin-dependent蛋白激酶。
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秦H, Raught B, Sonenberg N,戈尔茨坦如埃德尔曼
磷酸化筛选识别翻译起始因子4 gii Ca的细胞内目标(2 +)/ calmodulin-dependent蛋白激酶。
生物化学杂志。2003年12月5日,278 (49):48570 - 9。Epub 2003年9月24日。
- PubMed ID
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14507913 (在PubMed]
- 文摘
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CaMKI Ca2 + / calmodulin-dependent蛋白激酶,是真核细胞和组织中广泛表达,但很少,如果有的话,生理基质是已知的。我们人类的肺cDNA表达文库筛选潜在CaMKI基质固相原位磷酸化(“磷酸化筛查”)。多个重叠的部分长度的互补编码三种蛋白质被发现。其中两个已知蛋白质:6-phosphofructo-2-kinase /果糖2,6-bisphosphatase和真核翻译起始因子(eIF) 4 gii。确定CaMKI基质被磷酸化筛查代表真实的生理指标,我们检查了潜在的[Ca2 +] i -和CaMKI-dependent磷酸化eIF4GII体外和体内。从HEK293T细胞内源性eIF4GII免疫沉淀反应被CaMKI磷酸化,在体外重组片段的eIF4GII包括中央和c端区域。后者发生磷酸化与良好的动力学(公里= 1 microm;kcat = 1.8 s - 1)在一个地点,Ser1156位于一段eIF4GII eIF4GI的phosphoregion看齐。此处则映射和磷酸化实验显示[Ca2 +] i-dependent CaMKI特定站点,eIF4GII体内磷酸化。这种磷酸化被kinase-negative CaMKI符合要求为体内内源性CaMKI eIF4GII磷酸化。 We conclude that phosphorylation screening is an effective method for searching for intracellular targets of CaMKI and may have identified a new role of Ca2+ signaling to the translation apparatus.