交联的DNA修复蛋白Omicron6-alkylguanine DNA alkyltransferase DNA的存在抗肿瘤氮芥茉。
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loeb R, Michaelson E,方问,坎贝尔C·佩吉AE, Tretyakova N
交联的DNA修复蛋白Omicron6-alkylguanine DNA alkyltransferase DNA的存在抗肿瘤氮芥茉。
化学Res Toxicol。2008年4月21日(4):787 - 95。doi: 10.1021 / tx7004508。Epub 2008年2月14。
- PubMed ID
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18324787 (在PubMed]
- 文摘
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化疗的抗肿瘤活性氮芥茉包括苯丁酸氮芥、环磷酰胺、美法仑通常归因于能力诱导DNA DNA连续交叉连接的烷基化的两亲核的网站在DNA双工。dna蛋白质交联氮芥茉不是很透彻了,可能由于其固有的复杂性和敏感性不足以前的方法。如果成立,dna蛋白质轭合物可能导致氮芥的目标和非目标细胞毒性药物。在这里,我们表明,DNA修复蛋白,O (6) -alkylguanine DNA alkyltransferase (AGT),很容易对DNA交联的氮芥茉。苯丁酸氮芥和氮芥诱导形成的共价(32)之间的配合P-labeled双链oligodeoxynucleotides和重组人类AGT蛋白,sds - page探测到。毛细管HPLC-electrospray电离质谱(谱)分析的AGT处理苯丁酸氮芥的鸟嘌呤half-mustards或氮芥揭示蛋白质的能力,形成一个或两个鸟嘌呤的交叉连接。C145A AGT(包含一个单点变异的突变蛋白的活性位点)被发现能够形成一个鸟嘌呤共轭,而交联几乎是废除的治疗与鸟嘌呤half-mustards C145A / C150S AGT双突变体。HPLC-ESI (+) - MS / MS测序的胰蛋白酶的肽从野生型AGT蛋白获得处理氮芥茉的DNA的存在证实N7鸟嘌呤的位置之间的交联发生在DNA和两个活性部位残留在AGT蛋白(半胱氨酸(145)和半胱氨酸(150))。AGT-DNA的确切化学结构引起的交叉连接苯丁酸氮芥和氮芥被确定为N - (2 - [S-cysteinyl]乙基)- N - (2 - [guan-7-yl]乙基)- p-aminophenylbuyric酸和N - (2 - [S-cysteinyl]乙基)- N - (2 - (guan-7-yl)乙基)甲胺,分别基于HPLC-MS / MS分析蛋白玉米胚芽蛋白酶解物与相应的氨基酸配合准备的综合。Mechlorethamine-induced AGT-DNA轭合物分离蛋白提取的AGT-expressing CHO细胞,但不能控制细胞,表明氮芥茉可以交联AGT蛋白DNA在其他核蛋白质。 Because AGT is overexpressed in many tumor types, further investigations of the potential role of AGT-DNA cross-linking in the antitumor and mutagenic activity of antitumor nitrogen mustards are warranted.