人类的克隆和表达在大肠杆菌cDNA编码DNA修复蛋白N-methylpurine-DNA糖基化酶。
文章的细节
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引用
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Chakravarti D,楚GC•K Mitra年代
人类的克隆和表达在大肠杆菌cDNA编码DNA修复蛋白N-methylpurine-DNA糖基化酶。
生物化学杂志。1991年8月25;266 (24):15710 - 5。
- PubMed ID
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1874728 (在PubMed]
- 文摘
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871碱基对的互补编码人类N-methylpurine-DNA糖基化酶(MPG)从海拉S3 cDNA表达文库克隆在加州向量表型筛选MPG-negative(标签- alkA)大肠杆菌细胞暴露于methylmethane磺酸盐。主动MPG表达31-kDa融合蛋白。人类cDNA-encoded MPG释放3-methyladenine、7-methylguanine 3-methylguanine从DNA,因此类似土著的酶的底物范围和大肠杆菌AlkA蛋白质。不同的互补脱氧核糖核酸与限制的哺乳动物的DNA片段,但不与大肠杆菌或酵母DNA。基因库的搜索数据银行未能显示其他克隆DNA相似的序列。虽然人类的蛋白质序列有62%的同源性与相应的老鼠酶,只有少数氨基酸残基之间守恒的人类蛋白质和大肠杆菌和酵母mpg。然而,守恒的谷氨酰胺残留在所有mpg释放3-alkyladenine和精氨酸残基在真核mpg和大肠杆菌AlkA,此外N-alkylguanines表明这些残留物参与对腺嘌呤和鸟嘌呤DNA加合物,分别。虽然1.1千碱基mRNA MPG的人类和啮齿动物的大小相似,肝脏和培养细胞的老鼠有很多低层次的MPG mRNA比人类和小鼠细胞。仓鼠细胞系变体孤立作为抵抗methylmethane磺酸盐没有MPG mRNA水平高于父细胞系。