Kallistatin:人体组织激肽释放酶抑制剂。纯化、表征和反应中心序列。
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GX,坐月子L,曹国伟J
Kallistatin:人体组织激肽释放酶抑制剂。纯化、表征和反应中心序列。
生物化学杂志。1992年12月25日,267 (36):25873 - 80。
- PubMed ID
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1334488 (在PubMed]
- 文摘
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一种新的人体组织激肽释放酶抑制剂为kallistatin已经从等离子体净化明显的同质性聚乙二醇heparin-Agarose连续分离和色谱法,DEAE-Sepharose,羟基磷灰石,phenyl-Superose列。4350年净化因子实现的收益率大约1.35毫克每升的等离子体。纯化抑制剂迁移作为一个乐队的表观分子量58 kDa当分析SDS-polyacrylamide减少条件下凝胶电泳。它是一种酸性蛋白质用π值从4.6到5.2不等。没有发现免疫大kallistatin和其他serpins之间通过免疫印迹分析。Kallistatin抑制人体组织激肽释放酶激肽原和三肽底物的活动。二阶反应速率常数(ka)被确定为2.6 x 10(4)使用Pro-Phe-Arg-MCA m - 1 s - 1。抑制伴随着形成的克分子数相等的耐热和SDS-stable复杂组织激肽释放酶和kallistatin之间,代小羧基末端片段从抑制剂由于乳沟组织激肽释放酶活性部位。肝素钠块kallistatin复杂的形成与组织激肽释放酶,并破坏其抑制作用组织激肽释放酶的活动。kallistatin受阻的伴残渣。 Sequence analysis of the carboxyl-terminal fragment generated from kallistatin reveals the reactive center sequence from P1' to P15', which shares sequence similarity with, but is different from known serpins including protein C inhibitor, alpha 1-antitrypsin, and alpha 1-antichymotrypsin. The results show that kallistatin is a new member of the serpin superfamily that inhibits human tissue kallikrein.