热力学的后果突变游标带残留的人性化反人类表皮生长因子受体小鼠抗体,528。
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田中Makabe K, T录像,Tsumoto K, Y,近藤H, Umetsu M,宋Y,浅野R, Kumagai我
热力学的后果突变游标带残留的人性化反人类表皮生长因子受体小鼠抗体,528。
生物化学杂志。2008年1月11日,283 (2):1156 - 66。Epub 2007年10月17日。
- PubMed ID
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17947238 (在PubMed]
- 文摘
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调查游标带残留的作用,这是由框架区域和基础complementarity-determining地区(cdr)的抗体,在特定的高亲和力抗体的相互作用与他们的目标,我们专注于可变域528年鼠反人类表皮生长因子受体抗体片段(m528Fv)。嫁接的cdr m528Fv到所选框架地区的人类抗体,称为人性化,减少了抗体的亲和力目标1/40倍。亲和力的减少是由于大量减少消极的焓变化与绑定相关联。ligand-free抗体片段的晶体结构没有值得注意的构象变化由于人性化,和循环结构的cdr人源化抗体是相同的父抗体。几个CDR-grafted的突变体(人性化)可变域片段(h528Fv),一些微调区残留的重链取代亲代小鼠残留,建立了和准备使用细菌表达系统。相互作用的热力学分析突变体和可溶性细胞外表皮生长因子受体域显示几个单突变和双突变增加了负面的焓和热容变化。然而,结合这些突变导致有些减少消极的焓和热容变化。每个突变体的亲和力为野生型h528Fv范围内的目标,和这种相似性是由于焓熵补偿。这些结果表明,游标带残留做出向左反应贡献抗原绑定和构象熵变化的监管在人性化的小鼠抗体必须仔细考虑和优化。