克隆和测序的phosphotriesterase plasmid-borne基因(门诊部当)编码。
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McDaniel CS,哈珀,野生小
克隆和测序的phosphotriesterase plasmid-borne基因(门诊部当)编码。
J Bacteriol。1988年5月,170(5):2306 - 11所示。
- PubMed ID
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2834339 (在PubMed]
- 文摘
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质粒pCMS1从假单胞菌分离diminuta毫克,一个既定的应变水解广泛的有机磷化合物。原生质体与PstI限制,和个人DNA片段subcloned pBR322。一个重组质粒转化大肠杆菌具有弱水解活动,和南部印迹的原生质体DNA验证DNA序列起源于pCMS1。1.3千碱基片段克隆时放在lacZ的促进大肠杆菌M13mp10并使变回原形,再隔离与正确大小的插入展出isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside-inducible全细胞活动。序列测定M13结构识别975个碱基的开放阅读框之前一个假定的ribosome-binding网站适当的位置上游第一ATG开放阅读框的密码子。门诊部当基因的基因内融合lacZ基因产生了混合多肽immunoaffinity色谱纯化的β-半乳糖和用来证实门诊部当的开放阅读框。基因产物,有机磷phosphotriesterase,分子量为35418,如果假定开始网站是正确的。八十-百分之九十的酶活性与假单胞菌膜分数。当分离治疗0.1% Triton和1 M氯化钠,相关的酶活性是分子量约为65000年,这表明活跃的酶二聚的。