荧光技术技术分析视黄酸。
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Donato LJ,纳N
荧光技术技术分析视黄酸。
方法杂志。2010;652:177 - 87。doi: 10.1007 / 978 - 1 - 60327 - 325 - 1 - _10。
- PubMed ID
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20552429 (在PubMed]
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维甲酸(RA)是一种有效的转录激活的行为是由核激素受体家族的成员。除了扮演关键角色在胚胎发育和成年组织维护,类风湿性关节炎是一种有效的抗癌剂目前在临床用于治疗各种癌症。在这里,我们描述一个光学方法测量RA的浓度在生物样本。这种方法使用细胞视黄结合蛋白(CRABP-I),一种蛋白质,这种蛋白质结合RA与高亲和力和特异性,为其配体作为“读出”。替换(28)低浓缩铀CRABP-I的半胱氨酸残基允许共价连接的环境敏感荧光探针蛋白在该地区经历了重大的构象变化在配体绑定。协会的RA改性蛋白质从而导致变化的荧光探针,能够可靠的测量RA浓度低至50 nM。我们表明,该方法可以有效地用于RA血清中浓度测量和监控类风湿性关节炎的生物合成和降解培养的哺乳动物细胞。