部分纯化血管性血友病factor-cleaving蛋白酶的氨基酸序列。
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Gerritsen他,罗伯斯R, Lammle B,可•福尔兰正M
部分纯化血管性血友病factor-cleaving蛋白酶的氨基酸序列。
血。2001年9月15日,98 (6):1654 - 61。
- PubMed ID
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11535494 (在PubMed]
- 文摘
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血管性血友病factor-cleaving蛋白酶(vWF-cp)负责等离子vWF的不断降解多聚体从内皮细胞释放。血栓性血小板减少性紫癜患者缺乏,在等离子体显示异常庞大vWF多聚体。纯化vWF-cp可能用于替换在这些患者中,现在已经被等离子治疗。在这项研究中,vWF-cp从正常人血浆通过亲和色谱法纯化免疫球蛋白分数从患者自身抗体进一步vWF-cp和一系列色谱程序,包括蛋白质亲和色谱法G, Ig-TheraSorb,小扁豆凝集素、肝素。四个单链蛋白质乐队,由钠十二烷基sulfate-polyacrylamide nonreducing条件下凝胶电泳,显示(r)的150,140,130,和110 kd和被发现共享相同的n端氨基酸序列,表明它们来自同一多肽链被部分降解carboxy-terminal一端。疏水序列(Ala-Ala-Gly-Gly-Ile-Leu-His-Leu-Glu-Leu-Leu-Val-Ala-Val-Gly)的第一个15残留。凝胶过滤的蛋白酶迁移作为一种高分子量与clusterin复杂,70 kd蛋白chaperonelike活动。vWF-cp clusterin解除绑定到使用集中离液序列高的盐。vWF-cp在正常人类血浆或血清与clusterin无关,表明观察到的复杂是由于vWF-cp变性在净化过程。孵化期间活动vWF-cp异常稳定在37摄氏度; its in vitro half-life in citrated human plasma, heparin plasma, or serum is longer than 1 week. There was even a temporary increase in protease activity during the first 3 days of incubation.