纯化和表征的降钙素受体在大鼠肾脏膜共价交联技术。
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Bouizar Z, Fouchereau-Peron M, Taboulet J,总裁Moukhtar女士米克
纯化和表征的降钙素受体在大鼠肾脏膜共价交联技术。
欧元。1986 2月17日,155 (1):141 - 7。
- PubMed ID
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3004987 (在PubMed]
- 文摘
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我们有肾脏受体的绑定参数特征(Scatchard分析发现存在两个结合位点:网站我,Ka1 = 1.29 X 10 m - 1(9),结合位点的数量= 9.9 X 10(6) /毫克蛋白;网站二世,Ka2 = 0.93 X 10 (8) m - 1,结合位点的数量= 4.27 X 10(8) /毫克蛋白)和研究溶解的影响。高亲和性网站保存在亲和色谱法和净化过程的结果在一个6080倍的网站。lower-affinity网站也保存但整体净化因子约为40%低于使用分子筛选获得。beplayapp净化的肾降钙素受体分子筛选(Sephacryl s - 200)是伴随着高亲和性网站的全部损失;然而,低亲和力网站丰富1642倍。绑定参数得到纯化的分数。合成鲑鱼降钙素也绑定到肾膜使用双功能试剂disuccinimidyl辛二酸盐和photo-affinity交联使用hydroxysuccinimidyl azidobenzonate试剂。在相同的体积随着膜交联受体筛选了专门绑定鲑鱼降钙素(s - 200色谱法)。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析纯化分数显示几个蛋白带明显的分子质量从18 000 Da - 100 000 Da存在与否的还原剂(2-mercaptoethanol)。 Autoradiography of polyacrylamide gels of cross-linked calcitonin receptor showed only three protein bands specifically binding salmon calcitonin. Their molecular masses were 70 000 Da, 40 000 Da and 33 000 Da respectively. The 40 000-Da molecule represents a major band (47% total binding species). This suggests that these three proteins are the principal components of the calcitonin receptor and that S-S bonds are not involved in the assembly of the receptor subunits.