细菌表达,折叠,纯化和表征的可溶性NTPDase5 ecto-nucleotidase (CD39L4)。
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Murphy-Piedmonte DM,克劳福德PA, Kirley TL
细菌表达,折叠,纯化和表征的可溶性NTPDase5 ecto-nucleotidase (CD39L4)。
Biochim Biophys学报。2005年3月14日,1747 (2):251 - 9。doi: 10.1016 / j.bbapap.2004.11.017。Epub 2005年1月11日。
- PubMed ID
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15698960 (在PubMed]
- 文摘
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三磷酸的ecto-nucleoside diphosphohydrolases (eNTPDases)是一个家庭控制水平的细胞外核苷酸的酶,从而调节purinergically生理过程控制。中有6个已知NTPDases膜结合酶;只能释放可溶性NTPDase 5和6的酶。这里我们报告第一个细菌表达和重折叠的可溶性人类NTPDase5包涵体。结果表明,NTPDase5需要二价阳离子的存在(Mg2 +或Ca2 +)活动。积极协同对水解的首选基质(国内生产总值,国内流离失所者和UDP)是观察,这正协同减毒的核苷一磷酸产品(例如,GMP和AMP)。此外,比较野生型NTPDase5的生化特性和突变NTPDase5 (C15S缺乏单一,non-conserved半胱氨酸残基),也表示在细菌中,表明Cys15不是必要的适当的重折叠或酶活性(表明这渣没有参与二硫键)。此外,NTPDase5表达的衬底的细菌,以及C15S突变,决心是类似于长篇,膜结合在哺乳动物因为细胞和可溶性NTPDase5表示。