活性位点的功能替换的后果(磷)大肠杆菌的组氨酸残基琥珀酰辅酶合成酶。

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Majumdar R,小客人,布拉杰佤邦

活性位点的功能替换的后果(磷)大肠杆菌的组氨酸残基琥珀酰辅酶合成酶。

Biochim Biophys学报。1991年1月8日,1076 (1):86 - 90。0167 - 4838 . doi: 10.1016 / (91) 90223 - m。

PubMed ID

1986797 (在PubMed

]

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琥珀酸琥珀酰辅酶合成酶(EC 6.2.1.5:辅酶a连接酶(ADP-forming)大肠杆菌是一种α2β2四聚物,与活性位点被认为是位于两种亚基之间的接触点。它已经被先前建立的反应包括中间参与磷酸化酶催化过程中的形式。磷酸化的网站(- 246)和基质ADP和ATP的结合位点位于α亚基琥珀酸和β和辅酶a结合位点。这种酶的突变形式的,活性部位组氨酸残基天冬氨酸所取代,已经在大量生产和纯化同质性。这种形式似乎是不可区分的原生酶的亚基组装,但不能促进整体的反应。正如所料,他- 246α- - - - - Asp突变不能发生磷酸化。我们已经开发了一个分析基于琥珀酰辅酶的arsenolysis有效隔离的部分反应发生在部分活性部位由β亚基;这个反应不涉及共价参与他的α- 246。我们发现他- 246α- - - - - Asp突变也缺乏活动arsenolysis反应,表明一个完整的他- 246α微环境的建立需要在这部分的活性部位所需的相应步骤的整体反应。

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