两步酶法合成熊去氧胆酸与新7β-hydroxysteroid脱氢酶从瘤胃球菌属扭矩
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郑M,王R,李C,徐J
两步酶法合成熊去氧胆酸与新7β-hydroxysteroid脱氢酶从瘤胃球菌属扭矩
生物化学过程。2015年4月1日;(4):598 - 604。
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7β-hydroxysteroid脱氢酶(7β-hsdh)是一种高效的生物合成的关键酶熊去氧胆酸(UDCA)、原发性胆汁性肝硬化的有效药物和人体胆结石。在这项工作中,新7β-hsdh瘤胃球菌属扭矩写明ATCC 35915年指定为7β-hsdhrt,识别和异种的过表达在大肠杆菌酶合成熊去氧胆酸的鹅去氧胆酸(CDCA)。7β-hsdhrt一起在锅模式首先采用7α-hsdhca,另一个NADPH-dependent 7α-hsdh absonum梭状芽胞杆菌,CDCA转换成UDCA没有额外的辅酶再生。然而,最终的收益率仅仅限于73%,可能由于化学平衡。因此,提高UDCA屈服,我们或者采用一个两步酶参与的反应策略之间的第一反应只是heat-inactivated 1 st-step反应(脱氢)和2 nd-step反应(加氢),为了防止不受欢迎的bioreduction 7-oxo-LCA成CDCA的第二步。因此,UDCA分析产量的显著提高到98%以上的衬底载10毫米(ca。4 g L−1),没有任何可检测的中间(7-oxo-LCA)观察到在锅的情况下的反应。
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