肌凝蛋白磷酸酶的myosin-binding亚基的磷酸化Raf-1和抑制磷酸酶活动。
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Broustas CG, Grammatikakis N,埃托奥,削弱P, Brautigan DL Kasid U
肌凝蛋白磷酸酶的myosin-binding亚基的磷酸化Raf-1和抑制磷酸酶活动。
J生物化学杂志。2002年1月25日,277 (4):3053 - 9。Epub 2001年11月21日。
- PubMed ID
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11719507 (在PubMed]
- 文摘
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Raf-1丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶扮演着一个重要的角色在细胞生存、增殖,迁移;然而,Raf-1的具体目标不同的细胞过程并不明确。肌凝蛋白磷酸酶活动是至关重要的细胞骨架重组的规定,胞质分裂,细胞的能动性。在这里,我们描述Raf-1肌凝蛋白磷酸酶和磷酸化的协会的监管myosin-binding亚基(MBS)由Raf-1肌凝蛋白磷酸酶。细胞治疗与佛波醇12-myristate 13-acetate已被证明刺激Raf-1蛋白激酶。确定的影响在MBS磷酸化酶激活Raf-1, COS-1细胞与FLAG-tagged全长Raf-1暂时性的转染。显著更高的纯化谷胱甘肽S-transferase-tagged截断MBS蛋白磷酸化氨基酸(654 - 880)发生在存在FLAG-Raf-1免疫沉淀物从佛波醇12-myristate 13-acetate-treated细胞与未经处理的细胞(约3.0倍)。使用顺序kinase-phosphatase化验和磷酸化肌球蛋白轻链磷酸酶底物的反应,我们表明,Raf-1-associated蛋白质phosphatase-specific活动抑制(相对磷酸酶活动没有和腺苷5 ' - o - (3-thiotriphosphate): 100年,大约30%,分别)。此前,电离辐射可以激活Raf-1 (Kasid U。、Suy年代。影响,P。雷。, Whiteside, T. L., and Sturgill, T. W. (1996) Nature 382, 813-816). Exposure of cells to ionizing radiation resulted in the increased association of Raf-1 with MBS (3-6-fold versus unirradiated control) and inhibition of Raf-1-associated protein phosphatase-specific activity (relative phosphatase activity without and with ionizing radiation: 100 and approximately 54%, respectively). Our studies identify MBS as a new substrate of Raf-1 and implicate a role for Raf-1 in the regulation of pathways involving myosin phosphatase activity.